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《小迪开讲》D0013期:一张表读懂CRP各类检验方法利弊

2020-10-31 13:10:20

CRP

        CRP又称C-反应蛋白

故事的开始是这样

一张表读懂

CRP各类检验方法利弊





CRP又称C-反应蛋白,已成为诊断界又一颗冉冉升起的新星。当患者身体发生炎症反应时,CRP会第一时间在肝细胞中合成,其含量也会伴随患者的感染程度加重而不断升高,当患者疾病恢复时又会立即降低到正常水平。正是这位号称诊断界“及时雨”的急性蛋白,作为急性时相反应的一个极灵敏的指标,在炎症的临床感染、糖尿病、心脑血管类疾病等领域都应用广泛。


今天勤奋好学的小迪就为大家罗列了CRP日常检验工作中的常见检测方法,并对各类方法学的优缺点进行归纳。


CRP的检验方法通常可以归为两大类,一类是非标记免疫技术,另一类是标记免疫技术。前者的主要包括单向免疫扩散、乳胶凝集法和免疫比浊法,这几类方法学的反应原理中都不涉及分子标记的过程故归属于非标记免疫技术。标记免疫技术主要包括免疫层析法、ELISA、放射免疫、化学发光和电化学发光,后几类方法学的反应原理中都参与了分子标记的过程,只不过是彼此之间的标记物不同。


单向免疫扩散法又称单扩法,是临床上最早应用的CRP研究方法,它也是一种基于凝集反应原理的测试方法,其反应原理是在琼脂胶中混入抗体使得待测抗原从局部向琼脂内自由扩散,其形成的可见沉淀环与待测抗原量相关。但此类方法易存在抗原过量现象从而导致体系内不出现沉淀,故当CRP浓度过高时临床会出现假阴性现象。 乳胶凝集法是以乳胶颗粒作为载体的一种间接凝集试验,即将抗原吸附于乳胶颗粒表面,特异性抗体与之结合后产生凝集反应,但这种方法易受RF因子干扰,同时也存在假阳性和假阴性的现象。这两种方法学本身制约了其检测浓度的线性范围,实际测量结果误差较大,目前临床应用已很少。免疫比浊法又可分为透射比浊和散射比浊,两者在CRP反应原理上相似,只是在光波接收方式上不同。散射比浊由于其光波接收方式的特点,通常测量结果的灵敏度要优于透射比浊。透射比浊反应中需要分子足够大、足够多,故临床常添加增敏剂来提高反应灵敏度,胶乳增强法便因此出现了。大小适中,均匀一致的胶乳颗粒吸附或交联抗体后使得免疫复合物体积变大,溶液变非均相为均相,灵敏度得到了大大的提高。免疫比浊上由于其测试方便,结果准确已广泛应用于临床研究中。


荧光免疫层析技术是建立在层析技术和抗原抗体特异性免疫反应的基础上的一项免疫检测技术。利用荧光免疫层析试纸条可以实现对待测物的定性或定量检测。觉见的标记物可以是胶体金、量子点、镧系元素(上转发光)、纳米材料等。免疫层析法的检测通常受至于荧光易衰减、测试结果半定量的不足,通常在快速检测中应用广泛。而在实际大型综合医院中对测试结果的准确度要求较高,因此免疫标记类方法应用较多。免疫标记类技术从60年代最早出现的放射免疫到后来发展的酶联免疫(ELISA),到目前市场上主流测试方法化学发光和电化学发光,每一次技术的更新都有测量结果质的飞跃。以上便是CRP项目主要测试方法的简单介绍,具体各种方法学的优缺点小迪就不一一赘述了,大家可以在表格中一目了然,最后小迪想说,市场上并没有说哪种方法学比更一种方法学更好,每一种测试方法都有自己测试的优势,选择每个实验室最适合自己的才是王道。


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